安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作
 

　　1. 目的：明確安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
 

　　2. 范圍：適用于安捷倫液相色譜儀。
 

　　3. 職責(zé)：檢驗(yàn)人員對(duì)此負(fù)責(zé)。
 

　　4. 操作規(guī)程：
 

　　4.1 系統(tǒng)組成
 

　　本系統(tǒng)由1個(gè)溶劑二元輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、手動(dòng)進(jìn)樣閥、柱溫箱、檢測(cè)器、化學(xué)工作站和電腦等組成。
 

　　4.2 安捷倫液相色譜儀準(zhǔn)備
 

　　4.2.1使用前應(yīng)根據(jù)待檢樣品的檢驗(yàn)方法準(zhǔn)備所需的流動(dòng)相，用合適的0.45μm濾膜過(guò)濾，超聲脫氣20min。
 

　　4.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的色譜柱(柱進(jìn)出口位置應(yīng)與流動(dòng)相流向一致)和定量環(huán)。
 

　　4.2.3 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液(也可在平衡系統(tǒng)時(shí)配制)，用合適的0.45μm濾膜過(guò)濾。
 

　　4.2.4 檢查儀器各部件的電源線(xiàn)、數(shù)據(jù)線(xiàn)和輸液管道是否連接正常
 

　　4.1 將待測(cè)樣品按要求前處理，準(zhǔn)備HPLC 所需流動(dòng)相，檢查線(xiàn)路是否連接完好，廢液瓶是否夠用等。
 

　　4.3安捷倫液相色譜儀開(kāi)機(jī)：
 

　　4.3.1 打開(kāi)計(jì)算機(jī),進(jìn)入中文Windows XP畫(huà)面,并運(yùn)行CAG Bootp Server程序。
 

　　4.3.2 打開(kāi) 1200 LC 各模塊電源。
 

　　4.3.3 待各模塊自檢完成后，雙擊[Instrument 1 Online]圖標(biāo)，化學(xué)工作站自動(dòng)與1200LC
 

　　通訊，進(jìn)入的工作站畫(huà)面如下所示。
 

　　4.3.4 從[視圖]菜單中選擇[方法和運(yùn)行控制]畫(huà)面, 點(diǎn)擊[視圖]菜單中的[顯示頂部 工具欄]， [ 顯示狀態(tài)工具欄]，[系統(tǒng)視圖],[樣品視圖]，使其命令前有[√]標(biāo)志，來(lái)調(diào)用所需的界面。
 

　　4.3.5 把流動(dòng)相放入溶劑瓶中。
 

　　4.3.6 打開(kāi)沖洗閥。
 

　　4.3.7 點(diǎn)擊[泵]圖標(biāo)，點(diǎn)擊[設(shè)置泵…]選項(xiàng)，進(jìn)入泵編輯畫(huà)面。
 

　　4.3.8 設(shè)流速：5ml/min，點(diǎn)擊[確定]。
 

　　4.3.9 點(diǎn)擊[泵] 圖標(biāo)，點(diǎn)擊[控制…]選項(xiàng)，選中[啟動(dòng)]，點(diǎn)擊[確定] ，則系統(tǒng)開(kāi)始沖洗，直到管線(xiàn)內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無(wú)氣泡為止,切換通道繼續(xù)沖洗，直到所有要用通道無(wú)氣泡為止。
 

　　4.3.10 點(diǎn)擊[泵] 圖標(biāo)，點(diǎn)擊[控制…]選項(xiàng)，選中[關(guān)閉]，點(diǎn)擊[確定]關(guān)泵， 關(guān)閉沖洗閥。
 

　　4.3.11 點(diǎn)擊[泵]圖標(biāo)，點(diǎn)擊 [設(shè)置泵…選項(xiàng)]，設(shè)流速：1.0ml/min。
 

　　4.3.12 點(diǎn)擊泵下面的瓶圖標(biāo)，如下圖所示(以單元泵為例)，輸入溶劑的實(shí)際體積和瓶體積。 也可輸入停泵的體積，點(diǎn)擊[確定]。
 

　　4.4 安捷倫液相色譜儀的數(shù)據(jù)采集方法編輯
 

　　4.4.1開(kāi)始編輯完整方法：從[方法]菜單中選擇[編輯完整方法…] 項(xiàng)，如下圖所示選中除[數(shù)據(jù)分析 ]外的三項(xiàng)，點(diǎn)擊[確定]，進(jìn)入下一畫(huà)面。 4.4.2方法信息
 

　　4.4.2.1在[方法注釋]中加入方法的信息(如：測(cè)試方法)。 4.4.2.2 點(diǎn)擊 [確定]， 進(jìn)入下一畫(huà)面。 4.4.3 泵參數(shù)設(shè)定
 

　　4.4.3.1 在[流速]處輸入流量,如1ml/min，在[溶劑 B]處輸入80.0,(A=100-B) ,也可[插入 ]一行[時(shí)間表] ,編輯梯度。在[壓力限]處輸入柱子的大耐高壓，以保護(hù)柱子。
 

　　4.4.3.2 點(diǎn)擊[確定]，進(jìn)入下一畫(huà)面。
 

　　4.4.4 柱溫箱參數(shù)設(shè)定
 

　　4.4.4.1 在[溫度]下面的方框內(nèi)輸入所需溫度,如：40度。并選中它,點(diǎn)擊[更多>>] 鍵,如圖所示,選中[與左側(cè)相同]，使柱溫箱的溫度左右一致。
 

　　4.4.4.2 點(diǎn)擊[確定]，進(jìn)入下一畫(huà)面。
 

　　4.4.5 檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定：檢測(cè)波長(zhǎng)：一般選擇大吸收處的波長(zhǎng)。樣品帶寬：一般選擇大吸收值一半處的整個(gè)寬度。參比波長(zhǎng)：一般選擇在靠近樣品信號(hào)的無(wú)吸收或低吸收區(qū)域 。參比帶寬：少要與樣品信號(hào)的帶寬相等，許多情況下用100nm作為缺省值。同時(shí)可以輸入采集光譜方式，步長(zhǎng)，范圍，閾值。選中所用的燈。
 

　　4.4.6 在[ 運(yùn)行時(shí)選項(xiàng)表 ]中選中[ 數(shù)據(jù)采集]，點(diǎn)擊[確定]。
 

　　4.4.7 點(diǎn)擊[方法]菜單，選中[方法另存為…]，輸入一方法名，如[測(cè)試]，點(diǎn)擊[確定]。
 

　　4.4.8 從菜單 [視圖]中選中[在線(xiàn)信號(hào)],選中[信號(hào)窗口1],然后點(diǎn)擊[改變…] 鈕,將所要繪圖的信號(hào)移到右邊的框中,點(diǎn)擊[確定]。(如同時(shí)檢測(cè)二個(gè)信號(hào),則重復(fù)10,選中[信號(hào)窗口2]。
 

　　單擊[改變]鍵，即可彈出右側(cè)的[編輯信號(hào)圖譜]窗口，進(jìn)而選擇所需的譜圖信號(hào)。 4.4.9 從[運(yùn)行控制]菜單中選擇[樣品信息]選項(xiàng)，如下圖所示，輸入操作者名稱(chēng)，如[安裝工程師]；在[數(shù)據(jù)文件 ]中選擇[手動(dòng)]或[前綴/計(jì)數(shù)器]。區(qū)別: 手動(dòng)--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會(huì)將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉。 Pr—在前綴/計(jì)數(shù)器----[前綴]框中輸入前綴，在[計(jì)數(shù)器]框中輸入計(jì)數(shù)器的起始位，儀器會(huì)自動(dòng)命名，如vwd數(shù)據(jù)0001，vwd數(shù)據(jù)0002……。
 

　　4.4.10 點(diǎn)擊[確定] ,從[儀器] 菜單選擇[系統(tǒng)開(kāi)啟]。
 

　　4.4.11 等儀器準(zhǔn)備好，基線(xiàn)平穩(wěn)，用試樣溶液清洗注射器，并排除氣泡后抽取適量。
 

　　4.5 安捷倫液相色譜儀的數(shù)據(jù)分析方法編輯:
 

　　4.5.1 從[視圖]菜單中，點(diǎn)擊[數(shù)據(jù)分析]進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫(huà)面。
 

　　4.5.2 從[文件]菜單選擇[調(diào)用信號(hào)]，選中您的數(shù)據(jù)文件名，如下圖所示。點(diǎn)擊[ 確定]，則數(shù)據(jù)被調(diào)出。
 

　　4.5.3做譜圖優(yōu)化：從[圖形]菜單中選擇[信號(hào)選項(xiàng)]，如下圖所示。從[范圍] 中選擇[滿(mǎn)量程] 或[自動(dòng)量程] 及合適的時(shí)間范圍或選擇[自定義量程] 調(diào)整。反復(fù)進(jìn)行，直到圖的比例合適為止。點(diǎn)擊[ 確定]。
 

　　4.6安捷倫液相色譜儀積分:
 

　　4.6.1 從[積分]菜單中選擇[積分事件]選項(xiàng)，如下圖所示。選擇合適的[斜率靈敏度]
 

　　，[峰寬]，[小峰面積]，[小峰高]。